光學(xué)顯微鏡的觀察方法主要包括以下幾種：

明場觀察（Bright-field Observation）：

是所有光學(xué)顯微鏡照明技術(shù)中很簡單的一種。

樣品照明是透射的白光，樣品中的對比度由透射光在樣品的密集區(qū)域中衰減引起。

明場顯微鏡圖像的典型圖樣是明亮背景上的深色樣品。

應(yīng)用于常規(guī)鏡檢、病理、染色標(biāo)本等領(lǐng)域。

熒光觀察（Fluorescence Observation）：

利用某些分子能吸收特定波長的光線后再發(fā)射出更長波長的光線的特性（即熒光現(xiàn)象）。

通常使用熒光染料或轉(zhuǎn)染技術(shù)將熒光團(tuán)結(jié)合到目標(biāo)組織或細(xì)胞器等結(jié)構(gòu)上，再用熒光顯微鏡激發(fā)觀察。

具有高特異性、高靈敏度，適用于定位、定性、定量的研究。

廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究、醫(yī)療診斷和產(chǎn)業(yè)應(yīng)用等領(lǐng)域。

相差觀察（Phase Contrast Observation）：

利用被檢物體的光程（折射率×厚度）差進(jìn)行鏡檢。

通過環(huán)狀光闌和相板等特殊裝置，將光的相位差轉(zhuǎn)變?yōu)槿搜劭梢圆煊X的振幅差（明暗差）。

使原來透明的物體表現(xiàn)出明顯的明暗差異，對比度增強(qiáng)，適用于觀察無色透明的標(biāo)本，尤其適于培養(yǎng)的活細(xì)胞、組織觀察。

微分干涉觀察（Differential Interference Contrast, DIC Observation）：

利用偏振光，通過特制的棱鏡將偏振光分解，使光束在相位上略有差別，從而使圖像呈現(xiàn)出立體三維感覺。

可以使被檢物體產(chǎn)生三維立體感覺，觀察效果更直觀，適用于無色透明活體標(biāo)本的細(xì)微結(jié)構(gòu)觀察。

反射光暗場觀察（Dark-field Observation with Reflected Light）：

利用反射光觀察樣品表面的超微小結(jié)構(gòu)。

能夠觀察到小至0.004微米的結(jié)構(gòu)，但無法進(jìn)行準(zhǔn)確的測量，僅適合觀察。

偏光觀察（Polarized Light Observation）：

利用光的偏振特性對具有雙折射性物質(zhì)進(jìn)行研究鑒定。

可做單偏光觀察、正交偏光觀察、錐光觀察等，廣泛應(yīng)用于礦物、化學(xué)等領(lǐng)域，以及人體及動(dòng)物學(xué)方面的鑒別。

霍夫曼調(diào)制相襯觀察（Hoffman Modulation Contrast Observation）：

利用斜射光照射，將相位梯度轉(zhuǎn)變?yōu)楣鈴?qiáng)度變化，用于觀察未經(jīng)染色的樣品和活細(xì)胞。

適用于相位物體、雙折射物體、染色試樣、柱狀物體以及具有表面和次表面特征的物體進(jìn)行高分辨率顯微觀察。

這些觀察方法各有特點(diǎn)，適用于不同的研究領(lǐng)域和樣品類型。在實(shí)際應(yīng)用中，需要根據(jù)研究目的和樣品特性選擇合適的觀察方法。