倒置熒光顯微鏡是細胞培養(yǎng)、細胞轉(zhuǎn)染和很多生物研究中常用的儀器，相比共聚焦顯微鏡，倒置熒光顯微鏡的成像精度雖然稍低，但儀器更普及，更容易買到或者約到，而且使用維護都更簡單點。今天我們就給大家分享下倒置熒光顯微鏡使用可能遇到的常見問題，以及可能的解決辦法。

什么是倒置熒光顯微鏡

倒置熒光顯微鏡由倒置顯微鏡和落射熒光模塊組成，倒置顯微鏡是相對正置顯微鏡的概念，其物鏡、照明系統(tǒng)相對樣品的位置是顛倒的；落射熒光模塊是熒光觀察的核心部件，有轉(zhuǎn)盤式熒光模塊和集成熒光模塊兩種，轉(zhuǎn)盤式后期可升級，但需要獨立的熒光光源燈箱，用轉(zhuǎn)盤式模塊的倒置熒光顯微鏡更大、更重、更貴。

為什么要用倒置熒光顯微鏡

倒置熒光顯微鏡通常Z高只會配40X物鏡，因此放大倍率、分辨率不如正置熒光顯微鏡，但勝在應(yīng)用層面更方便好用。

一是、倒置熒光顯微鏡的物鏡有更長工具距離，可以適配各種培養(yǎng)皿從底部直接成像，從而節(jié)省了反復(fù)制樣做玻片的麻煩，效率更高更適合大批量、多視野培養(yǎng)細胞等樣品的觀察。

二是、倒置熒光顯微鏡可以無沾染觀察，無沾染意思是因為觀察無需打開培養(yǎng)皿，可避免取樣制樣帶來的沾染污染風(fēng)險。

三是、倒置熒光顯微鏡的優(yōu)勢是更大的工作空間，因為倒置熒光顯微的明場照明系統(tǒng)采用的是長工作距離聚光鏡，因此載物臺上方有更大空間，更方便安裝使用顯微操作系統(tǒng)等配件。

倒置熒光顯微鏡通常可以實現(xiàn)明場、相襯和熒光觀察，如果儀器附近有貼SOP或者說明書，可以看看，快速上手。明場觀察很簡單，可以看病理切片等樣品，這里不贅述；相襯觀察需要切換到相襯物鏡，然后把上光源光強調(diào)高，聚光鏡光闌調(diào)到PHP位置（最大位置），切換相襯環(huán)板到對應(yīng)的位置即可；難點是熒光觀察，不同倒置熒光顯微鏡有不同結(jié)構(gòu)，大致可以分為研究級倒置熒光顯微鏡和新型倒置熒光顯微鏡兩種。