熒光顯微鏡是利用一個(gè)高發(fā)光效率的點(diǎn)光源,經(jīng)過(guò)濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長(zhǎng)的光作為激發(fā)光,激發(fā)標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過(guò)物鏡和目鏡的放大進(jìn)行觀察的一個(gè)儀器。熒光顯微術(shù)是生物,醫(yī)學(xué)中的重要研究手段,如對(duì)生物組織、生理、病理、微生物、醫(yī)藥、食品、化學(xué)等諸方面的鑒定等。
熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種,與普通光學(xué)顯微鏡主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長(zhǎng)不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。
熒光顯微鏡的使用方法:
(1)打開(kāi)燈源,超高壓汞燈要預(yù)熱15min才能達(dá)到亮點(diǎn)。
(2)透射式熒光顯微鏡需在光源與暗視野聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾片,在物鏡的后面裝上相應(yīng)的壓制濾片。落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾片、雙色束分離器、壓制濾片的插塊。
(3)用低倍鏡觀察,根據(jù)不同型號(hào)熒光顯微鏡的調(diào)節(jié)裝置,調(diào)整光源中心,使其位于整個(gè)照明光斑的中央。
(4)放置標(biāo)本片,調(diào)焦后即可觀察。使用中應(yīng)注意:未裝濾光片不要用眼直接觀察,以免引起眼的損傷;用油鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須用無(wú)熒光的特殊鏡油;高壓汞燈關(guān)閉后不能立即重新打開(kāi),需待汞燈*冷卻后才能再啟動(dòng),否則會(huì)不穩(wěn)定,影響汞燈壽命。
(5)觀察。例如:在熒光顯微鏡下用藍(lán)紫光濾光片,觀察到經(jīng)0.01%吖啶橙熒光染料染色的細(xì)胞,細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)被激發(fā)產(chǎn)生兩種不同顏色的熒光(暗綠色和橙紅色)。